注: 真的并非原地踏步, 是绕了一圈, 才回来的……(*^__^*) 嘻嘻……
一段时间以来, 在实验室忙忙碌碌, 一个多月过去啦, 发现自己转了好大一个弯子, 然后又回来啦.
生物学实验, 不外乎克隆, 连接, 转化, 诱导表达, 分离纯化……
这两天, 做到了转化这一步. 于是乎, 进行载体和外源片段的酶连反应, 三十多个啊, 然后忙忙碌碌, 进行转化实验, 一直做到深夜十二点.
第二天早上一看, 嘿嘿, 基本上都长啦, 再仔细一看, 自连对照长了也不少, 和其它的相比, 甚至是有过之而无不及…… 抱着"试一试"的心理, 每个挑取了三个单菌落, 培养, 抽质粒……
最终发现, 抽取的质粒, 和原始的质粒, 大小都一样—–>都是自连的……
于是说, 我有回来啦…..
问题: 如何解决载体自连的问题?